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中性脂肪是脂质的一种。脂质是由中性脂肪、类脂以及其衍生物的统称。中性脂肪是储存能量的一种重要方式,分布于皮下、肌间组织和大网膜等。在正常情况下,除脂肪细胞外的细胞在显微镜下是看不到脂滴的,或仅可见少量的脂滴。如果细胞内出现脂滴或脂滴增多的现象称为脂肪变性。
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脂肪染色所用的组织切片方法是:
石蜡切片
细胞涂片
树脂切片
冰冻切片
火棉胶切片
常规的福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPE),因为在脱水处理过程中乙醇和二甲苯会溶解组织中的脂滴,HE染色后在显微镜下观察可见为一个一个的空泡,与溶解的糖原或水泡样变难以区分。因此,做脂肪染色通常要用冰冻切片(未经无水乙醇和二甲苯处理)。冰冻切片能较好的保存脂滴,经脂肪特殊染色,清晰地显示出来。
从以上描述可知,石蜡切片不能用于脂肪染色;细胞涂片不是组织切片方法;树脂切片是电镜的包埋方法;火棉胶切片多用于眼球、肺组织以及神经组织等。
因此,答案为。
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脂肪的特殊染色方法是:
过碘酸-Schiff(PAS)染色
刚果红染色
普鲁氏蓝反应
苏丹Ⅲ或油红O染色
阿尔辛蓝(AB)染色
PAS染色主要染中性粘液、糖原等物质;刚果红主要染淀粉样蛋白;普鲁氏蓝主要染含铁血黄素;阿尔辛蓝(AB)主要染酸性粘液。
中性脂肪的染色常用偶氮染料,如苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B和油红O等,也有用锇酸染色。这些染料不溶于水,稍溶于乙醇,但更容易溶于脂肪,因此被广泛应用于组织切片内脂润滴的染色。
其中,油红O染色较为常用。
答案为。
附:脂肪组织油红O染色法
一、染色方法:油红O法
(一)试剂配制
1.油红O贮备液
油红O0.5g
异丙醇ml
将油红O和异丙醇倒入三角烧瓶内,混匀,可置于热水水浴中加速溶解。待冷却后过滤,储存于密封砂塞瓶备用。
2.60%异丙醇
异丙醇60ml
蒸馏水40ml
3.甘油明胶
明胶10g
苯酚0.5ml
蒸馏水50ml
甘油50ml
明胶溶于蒸馏水,可放置于37℃水浴箱中,待明胶完全溶解后加入甘油,再加入苯酚充分混匀。该液储存于4~8℃冰箱中,使用前放入水浴箱内(45℃左右)溶化后即可以作为冰冻切片的封片剂。
(二)染色步骤
1.新鲜组织用冰冻切片,厚度约6~10μm。
2.将切片放入60%异丙醇中稍洗。
3.配制油红O工作液:油红O贮备液与蒸馏水,按3:2的比例混匀后静置10分钟。将切片放入油红O工作液染色浸染5~10分钟。染色时注意需要加盖密封,防止试剂挥发。
4.用60%异丙醇稍洗去多余染液,再用蒸馏水洗。
5.用Mayer苏木素浅染细胞核1~2分钟,流水冲洗10分钟。
6.把切片周围的水分擦干,用甘油明胶封片。
(三)染色结果
中性脂肪呈较深的橙红色,细胞核为蓝色。
大鼠-肝组织(10×),中性脂肪呈深橙红色
大鼠-脂肪细胞爬片(10×),中性脂肪脂滴呈深橙红色。
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